赵勇 钱辅仁 刘继敏 韩艳淑
提要 三厂家生产的二氧化氯产品，同样加20％柠檬酸激活30 min，溶液pH值分别为3.85、2.39与2.52，二氧化氯含量分别为18 653 mg/L、25 440 mg/L与14 450 mg/L。pH 3.85的溶液需以400 mg/L二氧化氯对大肠杆菌作用20 min，以1 500 mg/L二氧化氯对枯草杆菌黑色变种芽胞作用40 min，杀灭率才达100％；pH 2.52与pH 2.39的溶液均以100 mg/L二氧化氯对大肠杆菌作用10 min，分别以500 mg/L与750 mg/L二氧化氯对枯草杆菌黑色变种芽胞作用10 min，杀灭率即可达100％。
关键词 二氧化氯 杀芽胞剂 枯草杆菌黑色变种 大肠杆菌
COMPARISON OF GERMICIDAL EFFICACY OF THREE
CHLORINE DIOXIDE SOLUTIONS
Zhao Yong Qian Furen Liu Jimin Han Yanshu
(Hebei Provincial Sanitary and Anti-epidemic Station, Baoding 071000)
Abstract
Chlorine dioxide products produced by three factories were activated for 30 min by addition of 20% citric acid. The pH values of their solutions were 3.85, 2.39 and 2.52 respectively and their chlorine dioxide contents were 18 653 mgL, 25 440 mgL and 14 450 mgL respectively. When solution of pH 3.85 was used, 400 mgL chlorine dioxide with a 20 min contact time was required for killing 100% of Escherichia coli and 1500 mgL chlorine dioxide with a 40 min contact time was required for killing 100% of Bacillus subtilis var. niger spores. Solutions of pH 2.52 and pH 2.39 containing 100 mgL chlorine dioxide with a 10 min contact time could kill 100% of Escherichia coli and the same solutions containing 500 mgL and 750 mgL chlorine dioxide respectively with a 10 min contact time could kill 100% of Bacillus subtilis var. niger spores.
Key words chlorine dioxide sporicide Bacillus subtilis var. niger Escherichia coli
不同厂家生产的二氧化氯产品，虽均无色、无刺激性气味，均采用同量柠檬酸（每10 ml加2 g柠檬酸）激活30 min，但所产生二氧化氯浓度及其溶液pH值互不相同。为此，对其杀菌效果进行了试验比较。现将结果报道于下。
1 方法
1.1 二氧化氯含量测定
含量测定采用丙二酸-碘量法。取柠檬酸活化后的消毒液2.0 ml，加入100 ml容量瓶中稀释，混匀。取稀释液20 ml，置于含100 ml无离子水的碘量瓶中，加10％丙二酸溶液2 ml，摇匀。静置反应2 min，再加2 mol/L硫酸10 ml，10％碘化钾溶液10 ml。盖上盖并振摇混匀后, 加蒸馏水数滴于碘量瓶盖缘，置暗处5 min。用硫代硫酸钠标准溶液滴定游离碘，待溶液呈淡黄色时加入0.5％淀粉溶液10滴，溶液立即变蓝色。继续滴定至蓝色消失，记录用去的硫代硫酸钠溶液总量。每瓶样品重复测3次，取其平均值用下式计算二氧化氯含量。
式中，M与V分别为硫代硫酸钠溶液浓度（molL）与用量（ml），W为碘量瓶中所含二氧化氯原液量（ml）。
1.2 pH值测定
用pHS-3C型精密pH计检测二氧化氯原液的pH值。每瓶样品重复测3次，取平均值。
1.3 载体定量杀菌试验
试验用染菌布片进行。将大肠杆菌（8099）与枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞分别用含1％蛋白胨的磷酸盐缓冲液（PBS）制成菌悬液。取菌悬液0.02 ml，滴染于脱脂白平纹布片（10 mm×10 mm）上。置37℃培养箱内干燥20 min，制成不同菌的菌片。
试验时，将1片菌片加入5.0 ml消毒液（阳性对照为PBS）中。作用至规定时间，取出菌片，移入含5.0 ml中和剂溶液（含0.5％硫代硫酸钠、0.5％吐温80的PBS，经预试验证明, 中和二氧化氯符合要求）的试管中。中和作用10 min，敲打试管以洗脱菌片上菌并混匀。取洗脱液或其稀释液0.5 ml作普通营养琼脂倾注接种。置37℃培养48 h，观察结果，计算杀灭率。
2 结果
2.1 二氧化氯含量及pH值
经检测，3家厂产品激活后原液的二氧化氯含量与溶液pH值互不相同（表1）。
表1 不同厂产品的二氧化氯含量及pH值
Table 1 Chlorine dioxide content and pH value of
the products produced by different factories
产品编号Product No. 二氧化氯含量
Chlorine dioxide
content (mg／L)
pH值
pH
value
1 18 653 3.85
2 14 450 2.52
3 25 440 2.39
注: 结果为3次检测的平均值。
Note: The results are means of 3 tests.
2.2 杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞效果
以同浓度二氧化氯在相同条件下进行试验。结果，pH值为2.52的二氧化氯溶液杀灭枯草杆菌黑色变种芽胞效果较好，pH值为2.39者次之，pH值为3.85者较差（表2）。杀灭率达到100％的三者最低二氧化氯浓度与作用时间分别为：500 mgL作用10 min、750 mgL作用10 min、1 500 mgL作用40 min。
2.3 杀灭大肠杆菌效果
同在20℃条件下试验，pH值为2.52的二氧化氯溶液对大肠杆菌的杀灭效果亦较好，仍是pH值为3.85者较差（表3）。达到杀灭率为100％的最低二氧化氯浓度与作用时间，pH值为2.52或2.39的溶液，均以100 mgL二氧化氯作用10 min即可，而pH值为3.85者则需400 mgL二氧化氯作用20 min。
3 讨论
结果表明，虽然3家二氧化氯产品的外观、激活剂及其用量与激活时间均相同，但溶液中二氧化氯含量与溶液pH值却不
表2 不同厂家二氧化氯对枯草杆菌黑色变种芽胞
杀灭效果的比较
Table 2 Comparison of efficacy of chlorine dioxide
products produced by different factories in
killing spores of Bacillus subtilis var. niger
产品编号
Product
No.
pH值
pH
value
作用不同时间(min)的杀灭率(%)
Killing rate (%) after exposure for
different periods of time (min)
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