曹月升 任玉玺 张立志 刘朱梅
提要 以悬液定量杀菌试验观察了2%戊二醛溶液的杀菌影响因素。结果，在30℃下，以2％中性戊二醛溶液（pH 7.0）对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌作用5 min，杀灭率均达99.9％以上，对枯草杆菌黑色变种芽胞作用15 min的杀灭率亦达99.9％。在试验范围内，其杀菌效果随戊二醛溶液pH值增加、温度升高、作用时间延长而提高，随有机物增加而减低。
关键词 戊二醛 杀菌影响因素 温度 pH 有机物 杀芽胞剂 枯草杆菌黑色变种 白色念珠菌 金黄色葡萄球菌
EXPERIMENTAL OBSERVATION ON FACTORS INFLUENCING
GERMICIDAL EFFICACY OF GLUTARALDEHYDE
Cao Yuesheng Ren Yuxi Zhang Lizhi Liu Zhumei
(Hebei Provincial People's Hospital, Shijiazhuang 050071)
Abstract
2% neutral glutaraldehyde solution contains 0.3% sodium bicarbonate and has a pH value of 7.0. The factors influencing its germicidal efficacy were observed experimentally using suspension quantitative germicidal test. The results showed that the killing rates of Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans exposed to 2% neutral glutaraldehyde solution for 5 min at 30℃ were higher than 99.9%. The killing rate of spores of Bacillus subtilis var. niger exposed to the solution for 15 min also attained 99.9%. Under the test conditions, its germicidal efficacy increased with increasing pH value of the glutaraldehyde solution and temperature and prolonging the exposure time and decreased with increasing organic substances.
Key words glutaraldehyde factors influencing germicidal efficacy temperature pH organic substance sporicide Bacillus subtilis var. niger Candida albicans Staphylococcus aureus
继检测了戊二醛、过氧乙酸、碘伏等常用消毒剂杀灭绿脓杆菌最低有效浓度［1］之后，对戊二醛杀菌影响因素进行了试验观察。现将结果报告如下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
以金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）为试验菌。试验分组为：① 消毒剂+菌悬液；② （消毒剂+菌悬液）+中和剂；③ 中和剂+菌悬液；④（消毒剂+中和剂）+菌悬液；⑤ 正常菌对照；⑥未接种菌的培养基对照。试验结果，当第6组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10％，第1组不长菌或菌数明显少于第2组，第2组长菌数≥100 cfuml时，表明所用中和剂及其浓度适 宜［2］。
1.2 悬液定量杀菌试验
试验用2％中性戊二醛（pH值为7.0，含0.3％碳酸氢钠，天津市消毒药械有限公司产）进行。试验菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌（ATCC 25922）、枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞、白色念珠菌（ATCC 10231）。试验时，消毒液与菌悬液均恒温后，将0.5 ml菌悬液加入4.5 ml消毒液（阳性对照为无菌蒸馏水）中，混匀。恒温下作用至规定时间，取0.5 ml菌药混合液，加入4.5 ml中和剂溶液中，混匀。中和作用10 min，取该液或其稀释液1.0 ml接种平皿，倾注普通营养琼脂（白色念珠菌为沙氏葡萄糖琼脂），混匀。于37℃培养24 h（白色念珠菌于28℃培养5 d），计数菌落数，计算杀灭率［3］。
观察有机物影响时，向菌悬液中加入人血清。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
试验表明，含0.5％甘氨酸的磷酸盐缓冲液对2％中性戊二醛溶液的中和作用，符合规定要求（表1）。
2.2 作用时间对杀菌效果的影响
在30℃下，以2％中性戊二醛对悬液中菌作用1～15 min。试验结果，作用时间越长，杀菌效果越好（表2）。
2.3 溶液酸碱度对杀菌效果的影响
用盐酸或氢氧化钠调节戊二醛溶液pH值。结果，在试验范围内，随pH值增加杀灭率上升（表3）。
2.4 不同温度下的杀菌效果
在20～42℃，以2％中性戊二醛作用5 min，杀菌效果随着温度升高而增强（表4）。
2.5 有机物对杀菌效果的影响
对含人血清≤10％的菌悬液，在30℃下，以2％中性戊二醛作用5 min。结果，杀菌效果随血清浓度升高而降低（表5）。
表1 戊二醛中和剂试验结果
Table 1 Results of neutralizer test for glutaraldehyde
组别Group 平回收菌数Average bacterial count (cfu／ml)
消毒剂＋菌悬液 Disinfectant+bacterial suspension 0
(消毒剂＋菌悬液)＋中和剂 (Disinfectant+bacterial suspension)+ neutralizer 606
中和剂＋菌悬液 Neutralizer+bacterial suspension1 986 210
(消毒剂＋中和剂)＋菌悬液 (Disinfectant +neutralizer)+bacterial suspension1 986 138
正常菌对照 Normal bacterial contro l2 000 161
未接种菌的培养基对照 Uninoculated culture medium control 0
注: 试验菌为金黄色葡萄球菌。试验温度为20℃。2％中性戊二醛溶液加菌后作用10 min。加中和剂后作用10 min。结果为5 次试验平均值。 Note: The test bacterium was Staphylococcus aureus. The temperature was 20℃. The contact time after adding bacteria to 2% neutral glutaraldehyde solution was 10 min and that after adding neutralizer was 10 min. The results are means of test for 5 times.表2 作用时间对2%中性戊二醛溶液杀菌效果的影响
Table 2 Influence of exposure time on germicidal efficacy of 2% neutral glutaraldehyde solution
>试验菌Test bacterium 阳性对照组平均菌数
Average bacterial count
of positive control group(cfu／ml) 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%)
Average killing rate (%) after exposure
for different periods of time (min)
1 5 10 15
金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus 2 060 000 91.80 99.95 99.99 100.00
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