陈春田 刘希真 刘育京 宋承辉 孙华
提要 采用对倍稀释系列浓度定性试验法，测定醋酸氯己定对不同来源的4株温和气单胞菌的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果，北京从临床崐标本分离的3株与沈阳临床分离株对氯己定的抗力无明显差别。氯己定对它们的最小抑菌浓度与最小杀菌浓度分别为13.6 mgL与27.2 mgL。
关键词 氯己定 抑菌作用 杀菌作用 气单胞菌 大肠杆菌
INHIBITORY AND KILLING EFFECT OF CHLORHEXIDINE ON FOUR
STRAINS OF AEROMONAS CAVIAE
Chen Chuntian Liu Xizhen Liu Yujing Song Chenghui Sun Hua
(Institute of Military Medicine, Shenyang Military Area, Shenyang 110031)
Abstract
Minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) of chlorhexidine acetate for 4 strains of Aeromonas caviae from different sources were measured using doubling dilution serial concentration qualitative test. The results indicated that the resistance to chlorhexidine of 3 strains isolated from Beijing clinical specimens was not different significantly from that of the strain isolated from Shenyang clinical specimen. The MIC and MBC of chlorhexidine for them were 13.6 mgL and 27.2 mgL respectively.
Key words chlorhexidine bacteriostatic action bactericidal action Aeromonas Escherichia coli
1997年，在实验室测定了氯己定对北京和沈阳两地分离到的4株温和气单胞菌（Aeromonas caviae）的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。现将结果报告于下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
试验菌为大肠杆菌（8099）。试验设6组（表1）。试验结果，当第6组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10％，第1组不长菌或长菌量远少于第2组，第2组长菌量超过100 cfuml时，为选用的中和剂及其浓度合适［1］。
1.2 最小抑菌浓度（MIC）的测定
试验菌为大肠杆菌、温和气单胞菌（1株为中国人民解放军第202医院检验科分离自临床标本，3株为北京石景山区人民医院分离自临床标本，本实验室鉴定为温和气单胞菌的4个株）。试验时，取10支中试管，将消毒液用无菌蒸馏水对倍稀释成9种浓度，各取2 ml分别加入前9支试管中，第10管加2 ml无菌蒸馏水。再向各管加2 ml无菌双倍浓缩肉汤，混匀。然后，向各管加0.1 ml菌悬液（菌量达106cfuml）。于37℃培养24 h，观察结果。以不长菌（液体清澈透明）的最低浓度为最小抑菌浓度。
1.3 最小杀菌浓度（MBC）的测定
按上述方法加消毒液和菌液等，作用24 h。再向各管加2 ml中和剂，混匀。于37℃培养24 h，观察结果。以不长菌（液体清澈透明）的最低浓度为最小杀菌浓度。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
试验表明，以含0.3％卵磷脂、3.0％吐温80磷酸盐缓冲液中和含5 000 mgL醋酸氯己定溶液，结果符合要求（表1）。
表1 醋酸氯己定中和剂试验结果
组 别 平均菌数(cfu／ml)
消毒剂+菌悬液 58
(消毒剂+菌悬液)+中和剂 103
中和剂+菌悬液 357 000
(消毒剂+中和剂)+菌悬液 335 000
正常菌对照 365 000
未接种菌的培养基对照 0
注:试验温度为16～20℃。5000 mgL醋酸氯己定溶液加大肠杆菌后作用5 min。加中和剂（0.3％卵磷脂、3.0％吐温80磷酸盐缓冲液）后作用10 min。结果为3次试验平均值。2.2 最小抑菌浓度和最小杀菌浓度
结果表明，醋酸氯己定对大肠杆菌与温和气单胞菌最小抑菌浓度分别为3.4 mgL与13.6 mgL，最小杀菌浓度分别为13.6 mgL与27.2 mgL（表2）。
表2 醋酸氯己定MIC和MBC试验结果
细 菌 氯己定不同浓度(mg／L)的结果
27.2 13.6 6.8 3.4 1.7 0.0
MIC
大肠杆菌 0／5 0／5 0／5 0／5 2／5 5／5
温和气单胞菌沈阳株 0／5 0／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅰ株 0／5 0／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅱ株 0／5 0／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅲ株 0／5 0／5 5／5 5／5 5／5 5／5
MBC
大肠杆菌 0／5 0／5 4／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌沈阳株 0／5 5／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅰ株 0／5 4／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅱ株 0／5 4／5 5／5 5／5 5／5 5／5
温和气单胞菌北京Ⅲ株 0／5 4／5 5／5 5／5 5／5 5／5
注: 分母为试验次数，分子为长菌次数。试验温度为16～20℃。
3 讨论
3.1 在本试验中，氯己定对从北京和沈阳两地分离到的4株温和气单胞菌的最小抑菌浓度没有差别，最小杀菌浓度亦没有差别。因氯己定的杀菌机制是作用于细胞膜和脱氢酶［2］，故这4株温和气单胞菌的细胞膜或脱氢酶可能差别不大。
3.2 本结果中，临床分离到的温和气单胞菌对氯己定的抗力比大肠杆菌（8099）强。但要下大肠杆菌对氯己定抗力比其弱的结论，尚需经大量试验验证。
陈春田（沈阳军区军事医学研究所，沈阳 110031）
刘希真（沈阳军区军事医学研究所，沈阳 110031）
刘育京（沈阳军区军事医学研究所，沈阳 110031）
宋承辉（沈阳军区军事医学研究所，沈阳 110031）
孙华（沈阳军区军事医学研究所，沈阳 110031）
参考文献
［1］ 陈胤忠，袁朝森，胡琳，等. 过氧化氢复方消毒剂杀灭微生物效果的实验观察. 中国消毒学杂志，1998
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