王莉 张聿为
提要 复合季铵盐消毒剂主要成分为脂肪醇聚氧乙烯基甲基双辛基氯化铵、三月桂基氯化铵，季铵盐含量为6.0％。悬液定量杀菌试验表明，以其含100 mg/L季铵盐的溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用1 min，对白色念珠菌作用5 min，杀灭率均达99.9％。杀菌作用受有机物影响明显。该剂放置56℃下14 d，杀菌效果无明显变化。
关键词 复合季铵盐消毒剂 稳定性 杀菌作用 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 白色念珠菌
EXPERIMENTAL OBSERVATION ON GERMICIDAL EFFICACY
OF COMPLEX DISINFECTANT OF QUATERNARY AMMONIUM COMPOUNDS
Wang Li Zhang Yuwei
(Liaoning Provincial Sanitary and Anti-epidemic Station, Shenyang 110005)
Abstract
The main ingredients of the complex disinfectant of quaternary ammonium compounds are lipidol polyoxyethylene methyl dioctyl ammonium chloride and trilauryl ammonium chloride. The content of quaternary ammonium compounds is 6.0%. Suspension quantitative germicidal test indicated that the killing rates of Escherichia coli and Staphylococcus aureus exposed to its solution containing quaternary ammonium compounds 100 mg/L for 1 min and Candida albicans exposed to the same solution for 5 min attained 99.9%. The germicidal effect was obviously influenced by organic substances. The germicidal efficacy did not change obviously after storing at 56℃ for 14 days.
Key words complex disinfectant of quaternary ammonium compounds stability germicidal action Escherichia coli Staphylococcus aureus Candida albicans
复合季铵盐消毒剂主要成分为脂肪醇聚氧乙烯基甲基双辛基氯化铵和三月桂基氯化铵，季铵盐含量为6.0％。在实验室对其杀灭微生物效果及稳定性进行了试验观察。现将结果报道如下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
试验菌为大肠杆菌（8099）。试验设8组（表1）。试验结果，当第6、7、8组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10％，第1组不长菌或菌数远少于第2组，第2组菌数超过100 cfu/ml时，为所选中和剂及其浓度适宜。
1.2 悬液定量杀菌试验
试验菌为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、白色念珠菌（ATCC 10231）。试验时，将0.1 ml菌悬液与5.0 ml消毒剂溶液（阳性对照为0.03 mol/L磷酸盐缓冲液）混匀。作用至规定时间，取0.5 ml菌药混合液，加入盛有4.5 ml中和剂的试管中，混匀。中和作用10 min，取该液或其稀释液接种平皿，倾注普通营养琼脂（白色念珠菌为沙氏琼脂）并混匀。于37℃（白色念珠菌为32℃）培养48 h，计数菌落数，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向菌悬液中加小牛血清。
1.3 稳定性检测
将消毒剂原液装入试剂瓶中，密封瓶口后存放于56℃恒温箱中。于放置前后，分别取样检测其杀菌效果。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
试验表明，含2.0％吐温80、1.0％卵磷脂、0.5％亚硫酸钠的磷酸盐缓冲液中和含200 mg/L季铵盐的该消毒液可符合要求（表1）。
表1 复合季铵盐消毒剂中和剂试验结果
组 别 平均菌数(cfu／ml)
消毒剂+菌悬液
0
(消毒剂+菌悬液)+中和剂
180
中和剂+菌悬液
848000
(消毒剂+中和剂)+菌悬液
853000
正常菌对照
855000
未加菌PBS对照
0
未加菌中和剂对照
0
未接种菌的培养基对照
0
注: 试验温度为20℃。含200 mg/L季铵盐消毒液加大肠杆菌作用10 min，加中和剂后作用10 min。结果为3次试验平均值。
2.2 杀菌效果
悬液试验表明，以含100 mg/L季铵盐的该消毒剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用1 min，对白色念珠菌作用5 min，杀灭率均达99.9％（表2）。当菌悬液中含25％小牛血清时，含200 mg/L季铵盐的该消毒液对大肠杆菌作用5 min的杀灭率，由不含小牛血清时的99.99％降至99.39％（表3）。
表2 复合季铵盐消毒剂杀菌效果
季铵盐浓度
(mg／L) 作用不同时间(min)的杀灭率(%)
1 3 5 10
大肠杆菌
50 98.68 99.85 99.97 99.98
100 99.90 99.95 99.99 100.00
200 99.97 99.99 100.00 100.00
金黄色葡萄球菌
50 99.67 99.94 99.96 99.98
100 99.96 99.98 99.99 100.00
200 99.98 99.99 99.99 100.00
白色念珠菌
50 97.00 99.56 99.82 99.97
100 99.35 99.68 99.91 99.96
200 99.84 99.89 99.94 99.99
注: 试验温度为20℃。阳性对照组菌数，大肠杆菌为 790 000 cfu/ml，金黄色葡萄球菌为770 000 cfu/ml，白色念珠菌为843 000 cfu/ml。结果为 3次试验平均值。
2.3 稳定性
该剂在56℃下放置14 d，再稀释成含200 mg/L季铵盐的溶液，作用5 min对大肠杆菌的杀灭率，较放置前者无明显下降（表4）。
表3 小牛血清对复合季铵盐消毒剂杀灭大肠杆菌效果的影响
小牛血清浓度(%) 阳性对照组菌数(cfu／ml) 作用不同时间(min)
的杀灭率(%)
1 3 5
0 590000 99.94 99.97 99.99
25 550000 98.10 99.07 99.39
50 580000 97.88 98.90 99.01
注: 试验温度为20℃。消毒液含季铵盐200 mg/L。结果为3次试验平均值。
表4 复合季铵盐消毒剂放置56℃前后对大肠杆菌的杀灭效果
放置时间(d) 阳性对照组菌数(cfu／ml) 消毒组菌数(cfu／ml) 杀灭率(%)
0 620000 35 99.99
14 590000 108 99.98
注: 试验温度为20℃。以其含200 mg/L季铵盐消毒液作用5 min。结果为3次试验平均值。3 结语
结果表明，以含100 mg/L季铵盐的复合季铵盐消毒剂溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用1 min，对白色念珠菌作用5 min，杀灭率均达99.9％。其杀菌作用随季铵盐浓度增加、作用时间延长而增强，随菌悬液中小牛血清浓度增加而减弱。该剂密封保存于56℃下2周，杀菌效果无明显变化。
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