谈智 吉钟山
提要 2％强化碱性戊二醛溶液为含十七醇聚氧乙烯醚、碳酸氢钠、亚硝酸钠的戊二醛复方消毒剂（pH 8.47）。对其杀灭微生物效果及腐蚀性进行了试验观察。结果，该液对悬液中枯草杆菌黑色变种芽胞作用1 h，杀灭率达100％；作用20 min可使不锈钢片表面HBsAg抗原性破坏。其杀菌效果随戊二醛浓度减小、存在小牛血清、复方中不含亚硝酸钠而降低。其二元型原包装存放于53～55℃下14 d，戊二醛含量下降率为1.05％；混合液存放室温下28 d者下降率达29.70％。该液对金属无或基本无腐蚀作用。
关键词 戊二醛复方消毒剂 枯草杆菌黑色变种 杀芽胞作用 HBsAg 稳定性 腐蚀性 亚硝酸钠
EXPERIMENTAL OBSERVATION ON GERMICIDAL
EFFICACY AND CORROSIVENESS OF
POTENTIATED ALKALINE GLUTARALDEHYDE
Tan Zhi Ji Zhongshan
(Jiangsu Provincial Sanitary and Anti-epidemic Station, Nanjing 210009)
Abstract
2% potentiated alkaline glutaraldehyde solution is a glutaraldehyde compound disinfectant containing heptadecanol polyoxyethylene ether, sodium bicarbonate and sodium nitrite and has a pH value of 8.47. Its germicidal efficacy and corrosiveness were observed experimentally. The results showed that this solution with a 1 hour contact time could kill 100% of spores of Bacillus subtilis var. niger in suspension and it could destroy antigenicity of HBsAg on surface of stainless steel coupon in 20 min. Its germicidal efficacy decreased with decreasing concentration of glutaraldehyde, presence of calf serum and absence of sodium nitrite in the compound disinfectant. The glutaraldehyde content decreased by 1.05% after the disinfectant in binary packing was stored at 53～55℃ for 14 days and the glutaraldehyde content in the mixed solution decreased by 29.70% after storing at room temperature for 28 days. This solution has no or esentially no corrosive effect on metals.
Key words glutaraldehyde compound disinfectant Bacillus subtilis var. niger sporicidal effect HBsAg stability corrosiveness sodium nitrite
2％强化碱性戊二醛溶液中含十七醇聚氧乙烯醚（tricosa ethylene glycol heptadecanyl ether，强化剂）、碳酸氢钠、亚硝酸钠等辅助成分，pH值为8.47（江苏省常熟卫生消毒药剂厂产）。该产品采取二元型包装［1］，使用前将碳酸氢钠与亚硝酸钠加进溶液中。对其杀灭微生物效果及腐蚀性进行了试验观察。现将结果报告如下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
试验菌为枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞。试验设8组：① 消毒剂+菌悬液；② （消毒剂+菌悬液）+中和剂；③ 中和剂+菌悬液；④ （消毒剂+中和剂）+菌悬液；⑤ 正常菌对照；⑥ 未加菌磷酸盐缓冲液（PBS）对照；⑦ 未加菌中和剂对照；⑧ 未接种菌的培养基对照。试验结果，当第6、7、8组不长菌，第3、4、5组组间菌数差不超过10％，第1组不长菌或长菌量远少于第2组，第2组长菌量超过100 cfu/ml时，为所选中和剂及其浓度适宜［2］。
用乙型肝炎表面抗原（HBsAg）进行中和剂选择试验时，以HBsAg悬液代替菌悬液，中和剂中加10％小牛血清，第6组为中和产物（消毒剂加中和剂）对照，第7组为消毒剂+含10％小牛血清PBS对照，第8组为含10％小牛血清PBS对照。试验结果，当第6、7、8组S/N值<2.1，第3、4、5组S/N值相近，第2组S/N值≥2.1，第1组S/N值<2.1或远小于第2组时，为所用中和剂及其浓度适宜［3］ 。
1.2 杀灭微生物试验
1.2.1 悬液定量杀菌试验
制备含1%蛋白胨的枯草杆菌黑色变种芽胞悬液。试验时，将0.1 ml菌悬液与5.0 ml消毒液（阳性对照为PBS）混匀。作用至规定时间，取0.5 ml菌药混合液，与4.5 ml中和剂溶液混匀。中和作用10 min，取该液或其稀释液作活菌计数（37℃培养72 h)，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向芽胞悬液中加小牛血清。
1.2.2 破坏HBsAg抗原性试验
试验用染HBsAg载体进行。用含5％小牛血清PBS将纯化HBsAg稀释成含量为50 μg/ml的悬液。取20 μl悬液，滴染于直径15 mm、厚0.5 mm的不锈钢圆片上，置37℃使之干燥。试验时，将50 μl消毒液（阳性对照为消毒液与中和剂反应后的中和产物）加于染HBsAg片表面并涂匀。作用至预定时间，将该片投入盛有1 ml中和剂的试管中。中和作用10 min，振荡试管以洗脱片上的HBsAg。取洗脱液以ELISA法（实测试剂灵敏度为1.0 ng/ml）检测HBsAg抗原性。以消毒组OD值（S）与阴性对照（中和产物）OD值（N）的比值（S/N）<2.1为HBsAg抗原性破坏。
1.3 稳定性试验
将二元型包装消毒剂置54±1℃水浴中14 d。于放置前、后，分别取样测定戊二醛含量，计算其下降率。将加进碳酸氢钠与亚硝酸钠后的强化碱性戊二醛溶液置于室温（18～25℃）下4周。每周取样，测定pH及戊二醛含量，同时检测其杀菌效果。
.4 金属腐蚀试验
将不锈钢、碳钢、铝、铜等金属制成直径24±0.1 mm、厚1±0.1 mm的圆片（由中国预防医学科学院消毒室提供）。试验时，每种金属用一个容器，分别置消毒液中浸泡72 h。于浸泡前、后，分别将金属片清洗干净，经50±1℃烘干后称取金属片质量，计算腐蚀速率（R）。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
为比较强化碱性戊二醛与其中不含亚硝酸钠及不含碳酸氢钠、亚硝酸钠者的杀菌效果，对三者分别进行了中和剂试验观察。结果表明，以含1.0％甘氨酸、0.5％吐温80的PBS中和上述3种2％戊二醛消毒剂溶液，均可达到规定的要求（表1）。
表1 2%戊二醛消毒剂中和剂试验结果
Table 1 Results of neutralizer test for 2% glutaraldehyde disinfectant
组 别 Group 不同戊二醛溶液平均回收菌数Average bacterial count after exposure to different glutaraldehyde solutions (cfu／ml)
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