林玲 陈玉杰 李俐 曹原 孙庆祥
提要 由山楂榨取的原液呈淡黄色（pH值为5），含延胡索酸、熊果酸等多种有机酸。采用悬液定量杀菌试验，对其杀灭微生物作用及影响因素进行了观察。结果，1∶2稀释的山楂液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用1 min，对白色念珠菌作用3 min，杀灭率均达99.90％以上。菌悬液中含25％小牛血清，对其杀菌效果始有明显影响；温度在10～30℃内变化对其杀菌效果无明显影响。其原液密封存放于54℃下14 d，杀菌效果无明显下降。
关键词 植物消毒剂 山楂液 杀灭微生物作用 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 白色念珠菌 影响因素 稳定性
EXPERIMENTAL OBSERVATION ON GERMICIDAL EFFICACY OF
HAW LIQUID AND ITS INFLUENCING FACTORS
Lin Ling Chen Yujie Li Li Cao Yuan Sun Qingxiang
(Helongjiang Provincial Sanitary and Anti-epidemic Station, Harbin 150036)
Abstract
The stock liquid squeezed from haw presents light yellow color (pH is 5) and contains a variety of organic acids such as fumaric acid and ursolic acid. Its germicidal efficacy and influencing factors were observed using suspension quantitative germicidal test. The results indicated that the killing rates of Staphylococcus aureus and Escherichia coli exposed to 1∶2 dilute haw liquid for 1 min and Candida albicuns exposed for 3 min were higher than 99.90%. Presence of serum in the microorganism suspension did not influence the germicidal efficacy significantly until the calf serum content attained 25%. Temperature ranging from 10 to 30℃ did not influence the germicidal efficacy significantly. The germicidal efficacy of the stock liquid stored in airtight container at 54℃ for 14 days did not decrease significantly.
Key words herbal disinfectant haw liquid germicidal effect Staphylococcus aureus Escherichia coli Candida albicans influencing factor stability
由山楂榨取的原液为淡黄色，略有山楂气味，pH值为5。其主要成分为延胡索酸、熊果酸等多种有机酸。在实验室，对其杀灭微生物效果、杀菌影响因素以及稳定性进行了试验观察。现将结果报道如下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
试验菌为金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）。试验设8组：① 消毒剂+菌悬液；② （消毒剂+菌悬液）+中和剂；③ 中和剂+菌悬液；④ （消毒剂+中和剂）+菌悬液；⑤ 磷酸盐缓冲液（PBS）+菌悬液（正常菌对照）；⑥ 未加菌PBS对照；⑦ 未加菌中和剂对照；⑧ 未接种菌的培养基对照。第3、4、5组活菌计数所用稀释液分别为中和剂、中和产物（消毒剂+中和剂作用后溶液）和PBS。试验结果，当第6、7、8组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10％，第1组不长菌或菌数远少于第2组，第2组菌数超过100 cfuml时，为所选中和剂及其浓度适宜［1,2］。
1.2 悬液定量杀菌试验
试验菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌（8099）、白色念珠菌（ATCC 10231）。将试验菌第3～14代的营养琼脂（白色念珠菌为沙堡琼脂）培养基斜面24 h培养的新鲜菌苔，用含1％蛋白胨PBS洗下并稀释至预定浓度，制成菌悬液。试验时，取0.1 ml菌悬液与5.0 ml消毒液（阳性对照为PBS）混匀。作用至预定时间，取0.5 ml菌药混合液，加入盛有4.5 ml中和剂的试管中，混匀。中和作用10 min，取该液或其稀释液接种平皿，倾注普通营养琼脂（白色念珠菌为沙堡培养基）并混匀。于37℃（白色念珠菌为32℃）培养48 h，计数菌落数，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向菌悬液中加小牛血清。
1.3 稳定性试验
将原密封包装消毒液置54℃温箱14 d。于放置前、后，分别取样用悬液定量杀菌试验检测其杀菌效果。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
经试验，用含1.0％卵磷脂、3.0％吐温80的PBS中和1∶2稀释的山楂液可符合规定要求（表1）。
表1 山楂液中和剂试验结果
Table 1 Results of neutralizer test for haw liquid
组 别
Group 平均菌数Average bac-terial count(cfu／ml)
消毒剂＋菌悬液Disinfectant+bacterial suspension 0
(消毒剂＋菌悬液)＋中和剂(Disinfectant+bacterial suspension)+ neutralizer 450
娭泻图粒???Neutralizer+bacterial suspension1 120 000
(消毒剂＋中和剂)＋菌悬液(Disinfectant +neutralizer) +bacterial suspension1 156 000
正常菌对照Normal bacterial control1 118 000
未加菌PBS对照Bacteria-free PBS control 0
未加菌中和剂对照Bacteria-free neutralizer control 0
未接种菌的培养基对照Uninoculated culture medium control 0
注: 试验温度为20℃。将金黄色葡萄球菌悬液加入1∶2稀释的山楂液中作用1 min。加中和剂后作用10 min。结果为5 次试验平均值。 Note: The temperature was 20℃. The exposure time of S. aureus suspension added to 1∶2 dilute haw liquid was 1 min and the contact time after adding neutralizer was 10 min. The results are means of test for 5 times.2.2 杀菌效果
悬液试验表明，以稀释度为1∶2的山楂液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用1 min，对白色念珠菌作用3 min，杀灭率均达99.90％以上（表2）。
2.3 影响因素
试验表明，菌悬液中含10％小牛血清，对1∶2稀释的山楂液杀灭金黄色葡萄球菌效果无明显影响，含25％小牛血清者始有明显影响（表3）。
表2 山楂液对不同微生物的杀灭效果
Table 2 Efficacy of haw liquid in killing various microorganisms
消毒液稀释度Dilution ofdisinfectant 作用不同时间(min)的平均杀灭率(%)Average killing rate (%) after expo-sure for different periods of time (min)
更多相关文档请点击>>因素(1097)影响(3274)消毒(491)试验(780)th(160)min(268)作用(2694)及其(1567)观察(3338) |
|
