王国庆 刘衡川 张朝武 王波 王衡
提要 氯羟二苯醚为白色结晶粉末，以丙二醇溶解，再用水稀释制成消毒液。采用载体定量试验法，观察其杀灭微生物效果及影响因素。结果，用含氯羟二苯醚200 mg/L的溶液（pH 6.5）对不锈钢片表面金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用3 min，对白色念珠菌作用10 min，杀灭率均≥99.95％。杀菌效果因有机物增多、作用温度降低而下降，在消毒液pH值为3.0～7.0时无明显变化，pH值为9.0时明显下降。该剂于54℃下存放14 d，杀菌作用无明显变化。
关键词 氯羟二苯醚 杀菌效果 金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 白色念珠菌 影响因素 稳定性
STUDY ON GERMICIDAL EFFICACY OF 2,4,4'-TRICHLOR-2'-HYDROXYDIPHENYL-ETHER AND ITS INFLUENCING FACTORS
Wang Guoqing Liu Hengchuan Zhang Chaowu Wang Bo Wang Heng
（School of Public Health, Huaxi Medical University, Chengdu 610041）
Abstract 2,4,4'-Trichlor-2'-hydroxydiphenyl-ether is a white crystalline powder. It was dissolved in propylene glycol and diluted with water to form a disinfectant solution. The carrier quantitative test was used to observe its germicidal efficacy and its influencing factors. The results indicated that the solution containing 2,4,4'-trichlor-2'-hydroxydiphenyl-ether 200 mg/L (pH 6.5) could kill ≥99.95% of Staphylococcus aureus and Escherichia coli on surface of stainless steel coupons in 3 min and ≥99.97% of Candida albicans on surface of stainless steel coupons in 10 min. The germicidal efficacy decreased with increasing organic substances and decreasing the temperature, while it showed no significant change at pH value of the disinfectant solution ranging from 3.0 to 7.0 and decreased significantly at pH value of 9.0. Its germicidal efficacy did not change significantly after storing at 54℃ for 14 days.
Key words 2,4,4'-trichlor-2'-hydroxydiphenyl-ether germicidal efficacy Staphylococcus aureus Escherichia coli Candida albicans influencing factor stability
氯羟二苯醚（四川省天然气化工研究院提供）商品名为三氯新，为白色结晶粉末（氯羟二苯醚含量为99.3％～99.5％）。使用时，称取10 mg粉末，用10 ml丙二醇（分析纯）溶解，制得含氯羟二苯醚1 000 mg/L的消毒液，再以无菌蒸馏水稀释至使用浓度〔1〕。对其杀灭微生物效果及影响因素进行了试验观察。现将结果报道如下。
1 方法
1.1 中和剂选择试验
试验用金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）菌片（载体为直径15 mm不锈钢圆片）进行。试验分组如下：① 消毒剂+菌片；② (消毒剂+菌片)+中和剂；③ 中和剂+菌片；④ (消毒剂+中和剂)+菌片；⑤ 正常菌片对照；⑥ 无菌磷酸盐缓冲液（PBS）对照；⑦ 无菌中和剂对照；⑧ 未接种菌的培养基对照。试验结果，当第1组不长菌或长菌数很少，第2组长菌数明显多于第1组，第3、4、5组组间菌数（5×105～5×106cfu/
片）相差不超过10％，第6、7、8组均不长菌，表明所试中和剂及其浓度能 用〔1,2〕。
1.2 杀菌试验
试验采用载体定量试验法。试验时，将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌（8099）、白色念珠菌（ATCC 10231）分别染于直径15 mm不锈钢圆片表面，制成菌片。消毒液按1片菌片5 ml用量盛于无菌平皿中，再将菌片浸泡于消毒液（阳性对照为PBS）中。作用至规定时间，用无菌镊子取出菌片，放入盛有5.0 ml中和剂的试管中。中和作用10 min，再振打试管80次，以洗脱菌片上菌并混匀。取0.5 ml洗脱液（或其稀释液）作活菌计数，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向染不锈钢片菌悬液中加小牛血清。观察pH影响时，用1 mol/L氢氧化钠或盐酸溶液调节消毒液pH值。
1.3 稳定性试验
将消毒剂存于54℃孵箱（箱内相对湿度为75％±5％）内14 d。于存放前、后，分别取样，检测其杀菌效果。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
比较5种中和剂：① 0.5％甘氨酸、1.0％卵磷脂、3.0％吐温80PBS；② 2.0％卵磷脂、2.0％硫代硫酸钠、2.0％吐温80PBS；③ 1.0％硫代硫酸钠、1.0％甘氨酸、1.0％卵磷脂、2.0％吐温80PBS；④ 1.0％甘氨酸、1.0％卵磷脂、1.5％吐温80PBS；⑤ 1.0％卵磷脂、1.0％吐温80PBS。结果，以0.5％甘氨酸、1.0％卵磷脂、3.0％吐温80PBS为较好（其余4种的第4组菌数明显少于第3、5组者）。经用金黄色葡萄球菌菌片试验，证明用该中和剂可符合规定的标准（表1）。
2.2 杀菌效果
结果表明，用氯羟二苯醚50 mg/L溶液对不锈钢片表面金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用10 min，200 mg/L溶液对不锈钢片表面白色念珠菌作用10 min崐，杀灭率均≥99.91％（表2）。
2.3 杀菌影响因素
2.3.1 有机物
试验温度为20℃，含氯羟二苯醚100 mg/L（pH 6.5）溶液对不锈钢片表面金黄色葡萄球菌的杀灭效果，因染不锈钢片菌悬液中小牛血清浓度增加而减弱（表3）。
2.3.2 温度
含氯羟二苯醚100 mg/L（pH 6.5）溶液对无小牛血清保护的金黄色葡萄球菌杀灭效果，随作用温度升高而加强（表4）。
2.3.3 pH
试验温度为20℃时，pH值为3.0～7.0的含氯羟二苯醚100 mg/L溶液对无小牛血清保护的金黄色葡萄球菌杀灭效果，差异无统计学意义（P>0.4），当消毒液pH值增至9.0时，杀灭率明显下降（表5），差异有统计学意义（P<0.001）。
2.4 稳定性
经检测，该消毒剂于54℃下放置14 d，对不锈钢片表面金黄色葡萄球菌的杀灭效果无明显下降（表6）。
表1 氯羟二苯醚中和剂试验结果
Table 1 Results of neutralizer test for 2,4,4'-
trichlor-2'-hydroxydiphenyl-ether
>组 别Group 平均菌数Average bacterial count(cfu／片)
消毒剂+菌片
Disinfectant+bacterial
carrier
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