鲁晓晴 张超英
提要 采用悬液与气溶胶定量杀菌试验，对二氯异氰 尿酸钠溶液与气雾杀灭嗜肺军团菌效果进行了观察。以含有效氯250 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液（pH 6.4）对悬液中嗜肺军团菌作用1 min，杀灭率为100％。其杀菌作用随有效氯浓度增大、作用时间延长、温度升高而增强，随消毒液pH值升高、菌悬液中小牛血清浓度增加而减弱。在室温为23～25℃，相对湿度为60％～70％的条件下，用二氯异氰尿酸钠溶液喷雾，至空气中有效氯含量达2 mg/L，熏蒸40 min，对空气中嗜肺军团菌杀灭率为100％。
关键词 消毒剂 二氯异氰尿酸钠 杀菌作用 嗜肺军团菌 影响因素
STUDY ON EFFICACY OF SODIUM DICHLOROISOCYANURATE IN KILLING Legionella pneumophilia
Lu Xiaoqing Zhang Chaoying
（Department of Preventive Medicine, Medical School,Qingdao University, Qingdao 266021）
Abstract Using suspension and aerosol quantitative bactericidal tests, the efficacy of solution and aerosol of sodium dichloroisocyanurate in killing Legionella pneumophilia was observed. The solution of sodium dichloroisocyanurate containing available chlorine 250 mg/L (pH 6.4) with a 1 minute contact time could kill 100% of Legionella pneumophilia in suspension. The bactericidal efficacy increased with increasing concentration of available chlorine, prolonging contact time and increasing temperature, while it decreased with increasing pH value of the disinfectant solution and increasing the concentration of calf serum in the bacterial suspension. Under conditions of room temperature of 23～25℃ and relative humidity 60%～70%, spraying with solution of sodium dichloroisocyanurate to produce available chlorine content of 2 mg/L in air which was maintained for 40 min could kill 100% of Legionella pneumophilia in air.
Key words disinfectant sodium dichloroisocyanurate bactericidal action Legionella pneumophilia influencing factor
嗜肺军团菌（简称LP）广泛存在于水及土壤中，以含菌气溶胶形式污染空气，人体吸入后可发生军团病，病死率高达22.8％〔1〕。在实验室，进行了二氯异氰尿酸钠对其杀灭效果的研究。现将结果报告如下。
1 方法
1.1 菌悬液的制备
试验菌为嗜肺军团菌7型（简称LP7）。将其二氧化碳烛缸35℃的72 h活性炭—酵母提出液琼脂（简称BCYE）斜面培养物，用1～2 ml无菌生理盐水洗脱并经稀释，制成菌悬液。
1.2 中和剂选择试验
试验设平行6组：① 消毒剂+菌悬液；② （消毒剂+菌悬液）+中和剂；③ 中和剂+菌悬液；④ （消毒剂+中和剂）+菌悬液；⑤ 正常菌对照；⑥ 未接种菌的培养基对照。试验结果，当第6组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10％，第1组不长菌或长菌量远低于第2组，第2组长菌量超过100 cfu/ml时，表明所用中和剂及其浓度适宜〔2〕。
1.3 悬液定量杀菌试验
试验用现制LP菌悬液进行。将0.5 ml菌悬液与4.5 ml消毒液（阳性对照为无菌生理盐水）混匀。作用至规定时间，取菌药混合液0.5 ml，加入盛有4.5 ml中和剂的试管中，混匀。中和作用10 min，取该液（或其稀释液）1.0 ml接种BCYE平板。置二氧化碳烛缸35℃培养72 h，计数菌落数，计算杀灭率。
1.4 空气消毒试验
对2 间12 m3气雾室内喷LP菌悬液（含菌量为105cfu/ml）30 ml形成气溶胶。分别用BCYE平板沉降法进行消毒前空气采样后，对一间气雾室用二氯异氰尿酸钠溶液喷雾（使空气中有效氯含量达2 mg/L）消毒，另一间喷等量无菌生理盐水作对照。作用至规定时间，再分别作空气采样。置二氧化碳烛缸35℃培养72 h，计数菌落数，计算衰亡率（对照组）与杀灭率。
2 结果
2.1 中和剂试验结果
试验表明，用0.5％硫代硫酸钠溶液中和含有效氯1000 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液，达到所定指标（表1）。
表1 二氯异氰尿酸钠中和剂试验结果
Table 1 Results of neutralizer test for sodium
dichloroisocyanurate
组 别 Group 平均菌数
Average bac-
terial count
(cfu／ml)
消毒剂＋菌悬液
Disinfectant+bacterial suspension 0
(消毒剂＋菌悬液)＋中和剂
(Disinfectant+bacterial
suspension)+ neutralizer 110
中和剂＋菌悬液
Neutralizer+bacterial suspension 1520000
(消毒剂＋中和剂)＋菌悬液
(Disinfectant +neutralizer)
+bacterial suspension 1480000
正常菌对照
Normal bacterial control 1560000
未接种菌的培养基对照
Uninoculated culture
medium control 0
注: 试验温度为22℃。消毒液含有效氯1000 mg/L（pH
6.4），加LP后作用0.5 min。加中和剂后作用10
min。结果为3 次试验平均值。
Note: The temperature during the test was 22℃. The di-sinfectant solution contained available chlorine 1000 mg/L (pH 6.4). The contact time after adding L. pneumophilia was 0.5 min and that after adding neutralizer was 10 min. The results are means of test for 3 times.
2.2 杀灭嗜肺军团菌效果
结果表明，以含有效氯250 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液（pH 6.4）作用1 min，含有效氯100 mg/L与50 mg/L者分别作用5 min与10 min，对悬液中LP的杀灭率均为100％（表2）。
2.3 杀菌效果的影响因素
2.3.1 温度
在10～50℃试验表明，以含有效氯100 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液（pH 6.4）作用1 min，对悬液中LP杀灭率随温度升高而上升（表3）。
2.3.2 pH
试验用氢氧化钠和盐酸调节消毒液pH值。以含有效氯100 mg/L而pH值不同的二氯异氰尿酸钠溶液分别对LP作用1 min，在pH值为3.0～9.0范围内，对悬液中LP杀灭率随pH值升高而下降（表4）。
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