微波与苯扎溴铵复方消毒剂协同杀菌影响因素的试验观察

高东旗　单万松　张晓梅 　　提要 作者采用正交设计安排试验，观察了微波与苯扎溴铵复方消毒剂协同杀菌的影响因素。经载体定量杀菌试验表明，650 W、2 450 MHz微波与50 ml含0.2％苯扎溴铵的碳酸盐溶液协同作用3 min，对放于装有外科器械之塑料盒内的不锈钢片表面枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率达100％。在试验范围内，杀菌效果受作用时间影响显著，受盒内外科器械量影响接近显著，受菌片上小牛血清量影响不显著。 　　关键词　微波　苯扎溴铵复方消毒剂　协同杀菌作用　细菌芽胞　枯草杆菌黑色变种　影响因素 EXPERIMENTAL OBSERVATION ON FACTORS INFLUENCING THE SYNERGETIC BACTERICIDAL EFFICACY OF MICROWAVE AND BENZALKONIUM BROMIDE COMPOUND DISINFECTANT Gao Dongqi (Institute of Military Medicine, Beijing Military Area, Shijiazhuang 050081) Shan Wansong （No. 52966 Military Hospital, CPLA　Shijiazhuang 050081） Zhang Xiaomei （Norman Bethune International Peace Hospital　Shijiazhuang 050052） Abstract Orthogonal test was used to observe the factors influencing the synergetic efficacy of microwave and benzalkonium bromide compound disinfectant. The carrier quantitative bactericidal test indicated that combination of 650 W, 2450 MHz microwave irradiation and 50 ml of carbonate solution containing 0.2% benzalkonium bromide with a 3 minute contact time could kill 100% of spores of Bacillus subtilis var. niger on surface of stainless steel coupon in the plastic box containing surgical instruments. Under conditions of the test, the bactericidal efficacy was influenced significantly by the contact time and the influence of the quantity of surgical instruments in the box was near significant, while the amount of calf serum on the bacterial carrier did not show significant influence. 　　Key words　microwave　benzalkonium bromide compound disinfectant　synergetic bactericidal efficacy　bacterial spore　Bacillus subtilis var. niger　influencing factor 　　我们曾以含碳酸盐缓冲液及0.2%苯扎溴铵（新洁尔灭）的复方消毒液与微波协同消毒手术器械，取得了较好的效果［1］。该复方用量较大（每次需300 ml），作用时间较长，易损坏器械。为此，调节碳酸盐加入量，研制出新的含2.0%苯扎溴铵的复方消毒剂。现将其与微波协同杀菌作用及影响因素的试验结果报告如下。 　　1 方法 　　1.1 中和剂选择试验 　　试验菌为枯草杆菌黑色变种(ATCC 9372)芽胞。试验分组为：① 杀菌因子（微波与消毒剂协同作用）+菌悬液；② （杀菌因子+菌悬液）+中和剂；③ 中和剂+菌悬液；④ （杀菌因子+中和剂）+菌悬液；⑤ 磷酸盐缓冲液（PBS）+菌悬液（正常菌对照）；⑥ 未加菌PBS对照；⑦ 未加菌中和剂对照；⑧ 未接种菌的培养基对照。试验结果，当第6、7、8组不长菌，第3、4、5组组间菌数相差不超过10%，第1组不长菌或菌数远少于第2组，第2组菌数超过100 cfuml时，表明所用中和剂及其使用浓度适　宜［2,3］。 　　1.2 杀菌试验 　　试验用染菌载体（直径15 mm的不锈钢圆片）进行。将枯草杆菌黑色变种芽胞悬液用含1%蛋白胨的PBS稀释，滴染于钢片上，制成菌片（回收菌数为5×105～5×106cfu片）。观察有机物影响时向该芽胞悬液中加小牛血清。 　　试验在飞龙牌微波炉（频率为2450 MHz，输出功率为90～650 W，内腔长、宽、高分别为36 cm、33 cm与23 cm）中进行。以16 cm×30 cm长方形微波炉专用塑料盒装入清创手术器械（包括直血管钳4把、组织钳2把、布巾钳4把、消毒钳1把、小弯血管钳4把、持针器1把、有齿和无齿镊各1把，为较多器械量组）, 静脉切开器械（包括手术刀1把、静脉拉钩1个、弯止血钳1把、直止血钳2把、手术剪1把、皮肤消毒钳1把、持针钳1把、布巾钳2把、无齿和有齿短镊各1把，为中等器械量组）, 或一套外科伤口换药及拆线器械（包括镊子2把和剪刀1把，为较少器械量组）。将染菌不锈钢片分别放在盒中四角和中央，共5片（阳性对照组菌片装于平皿中，不经消毒处理）。取用蒸馏水10倍稀释的苯扎溴铵复方溶液50 ml，加于盒内。再经微波照射至预定时间，取出菌片，放入装有5 ml中和剂的试管里。中和作用30 min，洗脱菌片上菌并混匀。取洗脱液0.5 ml作活菌计数，计算杀灭率。 　　1.3 杀菌影响因素试验 　　预试验结果崐表明，湿度、温度（10～30℃）对本方法杀菌效果的影响较小。已有报道，输出功率较高的微波杀菌作用较　强［4］。在本试验中，固定微波输出功率、消毒液用量，选择下列3种因素，每因素设3水平，按L9（34）正交表（表1）安排试验［5］。 　　杀菌指标为：杀菌效果（X）=lgN0-lgNt，N0和Nt分别是阳性对照组与消毒组菌片回收的菌数。 　　　表1 微波与苯扎溴铵复方消毒剂协同杀菌影响因素试验的因素和水平 　　　Table 1 Factors and levels of test for factors influ- encing synergetic bactericidal efficacy of micro-wave and benzalkonium bromide compound di-　　 sinfectant 试验因素Factortested 水　平Level 1 2 3 A作用时间（min） 3 2 1 A: Contact time (min) 　 　 　 B: 外科器械量 较少 较多 中等 B: Quantity of surgicalinstruments Few Many Moderate C: 小牛血清含量(%) 　25 0 50 C: Calf serum content (%) 　 　 　 2 结果 　　2.1 中和剂试验结果 　　试验表明，以含3.0%吐温80和0.3%卵磷脂的PBS中和该复方消毒剂10倍稀释液（含0.2％苯扎溴铵）可符合规定的要求（表2）。 　　　表2 苯扎溴铵复方消毒剂与微波协同作用中和剂试验结果 　　　Table 2 Results of neutralizer test for synergetic efficacy of benzalconium bromide compound disinfectant and microwave 组　别　　Group 平均菌数Average bac-terial count(cfu／ml)     更多相关文档请点击>>因素(1097)影响(3274)消毒(491)微波(174)试验(780)协同(44)杀菌(30)作用(2694)观察(3338)