张国利 孙克勤
提要 采用载体定量杀菌试验，观察了三氯异氰尿酸对微生物的杀灭效果。结果，以其含500 mg/L有效氯的溶液作用15 min，对布片表面枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率达100％。对受50％小牛血清保护的该芽胞，则需作用45 min。对不锈钢片表面HBsAg，需以其750 mg/L有效氯溶液作用40 min，才能将HBsAg抗原性完全破坏。
关键词 三氯异氰尿酸 杀芽胞作用 枯草杆菌黑色变种 HBsAg
EXPERIMENTAL OBSERVATION ON GERMICIDAL EFFICACY
OF TRICHLOROISOCYANURIC ACID
Zhang Guoli Sun Keqin
(Hebei Provincial Sanitary and Anti-epidemic Station, Baoding 071000)
Abstract
The germicidal efficacy of trichloroisocyanuric acid was observed using carrier quantitative germicidal test. The results indicated that its solution containing available chlorine 500 mg/L with a 15 min contact time could kill 100% of spores of Bacillus subtilis var. niger on cloth strip, while for killing 100% of these spores protected by 50% calf serum, 45 min was required. For complete destruction of HBsAg antigenicity on surface of stainless steel coupon, the solution containing available chlorine 750 mg/L with a 40 min contact time was required.
Key words tirchloroisocyanuric acid sporicidal action Bacillus subtilis var. niger HBsAg
三氯异氰尿酸白色粉剂有效氯含量>90％。在实验室对其杀灭微生物效果进行了试验观察。现将结果报道如下。
1 方法
1.1 载体定量杀菌试验
试验菌为枯草杆菌黑色变种（ATCC 9372）芽胞、金黄色葡萄球菌（ATCC 6538）、大肠杆菌（8099）。将菌悬液滴染于脱脂白平纹布片（1.0 cm×1.0 cm）上，制成菌片。试验时，将菌片投入5 ml消毒液（阳性对照组为磷酸盐缓冲液）中。作用至规定时间，取出菌片，放入装有5 ml中和剂（经预试验选定为含0.5崐％硫代硫酸钠、0.5％吐温80的磷酸盐缓冲液）的试管中。中和作用10 min，振打试管以洗脱布片上菌并混匀。取洗脱液作活菌计数，计算杀灭率。
观察有机物影响时，向菌悬液中加50％小牛血清。
1.2 破坏乙型肝炎表面抗原试验
取乙型肝炎表面抗原（HBsAg）含量为50 μg/ml的悬液0.02 ml，滴染于直径0.6 cm的不锈钢圆片上，干燥后制成HBsAg片。试验时，取50 μl消毒液（阳性对照为消毒剂与中和剂作用后的中和产物）滴于HBsAg片中央，涂匀。作用至规定时间，将HBsAg片移入装有1.0 ml中和剂溶液（预试验选为含上述中和剂成分与10％小牛血清的磷酸盐缓冲液）的试管中。中和作用10 min，震荡试管以洗脱不锈钢片上HBsAg并混匀。取洗脱液以ELISA法（试剂灵敏度为1 ng/ml）检测HBsAg抗原性。检测结果，以试验组OD值(S)与阴性对照（中和产物）OD值(N)的比值（S/N）<2.1，为HBsAg抗原性完全破坏。
2 结果
2.1 杀菌效果
以三氯异氰尿酸的500 mg/L有效氯溶液对布片上枯草杆菌黑色变种芽胞作用15 min，以其125 mg/L和75 mg/L有效氯溶液分别对布片上金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用10 min，杀灭率均达100％（表1）。当菌悬液中加50％小牛血清再滴染布片时，其500 mg/L有效氯溶液对枯草杆菌黑色变种芽胞杀灭率达100％的作用时间，需延长至45 min。
用含500 mg/L有效氯的三氯异氰尿酸溶液擦拭油漆台面后作用10 min，对自然菌的灭除率≥92.17％。
表1 三氯异氰尿酸对微生物的杀灭效果
有效氯含量
(mg／L) 作用不同时间(min)的杀灭率(%)
3 5 10 15
枯草杆菌黑色变种芽胞
500 99.68 99.99 100.00
250 92.50 98.07 99.93
125 18.38 60.00 97.95
金黄色葡萄球菌
125 99.74 99.98 100.00
100 98.79 99.91 99.99
75 88.77 98.83 99.95
大肠杆菌
100 99.99 100.00 100.00
75 99.76 99.93 100.00
50 99.39 99.81 99.99
注: 试验温度为18～22℃。阳性对照组菌数，枯草杆菌黑色变种芽胞为1 360 000 cfu/片，金黄色葡萄球菌为 1 140 000 cfu/片，大肠杆菌为775 000 cfu/片。结 果为5次试验平均值。
2.2 对HBsAg抗原性破坏作用
以有效氯含量为1 500 mg/L和750 mg/L的三氯异氰尿酸溶液，分别作用20 min和40 min，可将不锈钢片表面HBsAg抗原性完全破坏（表2）。
表2 三氯异氰尿酸对HBsAg的破坏作用
有效氯含量
(mg／L) 作用不同时间(min)的S／N值
5 10 20 40
3000 22.80 8.06 0.63 0.76
1500 137.96 58.71 0.63 0.63
750 132.75 69.61 42.41 0.96
注: 试验温度为19～21℃。阳性对照组S/N值为290.56。结果为3次试验平均值。
3 结语
试验表明，对布片上枯草杆菌黑色变种芽胞，以三氯异氰尿酸的500 mg/L有效氯溶液作用15 min，对布片上金黄色葡萄球菌与大肠杆菌则分别以其125 mg/L与75 mg/L有效氯溶液作用10 min，杀灭率均为100％。50％小牛血清对其杀菌效果有明显影响。对不锈钢片表面HBsAg，需以其1 500 mg/L有效氯溶液作用20 min，或750 mg/L有效氯溶液作用40 min，才能将HBsAg抗原性完全破坏。
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